ONPG CAS : 369-07-3 98,0 % Min blanc à poudre blanc cassé
| Numéro de catalogue | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Nom du produit | ONPG (2-nitrophényl-bêta-D-galactopyranoside) |
| Formule moléculaire | C12H15NO8 |
| Masse moléculaire | 301.25 |
| Détails de stockage | 2 à 8 °C |
| Code tarifaire harmonisé | 29400000 |
Spécification de produit
| Pureté (HPLC) | Min.98,0 % |
| Apparence | Poudre blanche à blanc cassé |
| Solution(1% dans l'eau) | Solution limpide, incolore à légèrement jaune |
| Teneur en eau(Karl Fisher) | Max.0,5 % |
| Rotation optique spécifique [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0°C à -73,0°C |
Discussion sur le test ONPG (test β-galactosidase)
Des questions ont été fréquemment soulevées récemment : 1. Pourquoi le test ONPG peut-il être utilisé pour distinguer la fermentation retardée du lactose ?2. Pourquoi la norme nationale stipule-t-elle qu'il est nécessaire d'utiliser 3 % de chlorure de sodium trisaccharide fer (ou trisaccharide fer) pour le test ONPG ?3. Pour Vibrio parahaemolyticus, lors de la réalisation d'un test OPNG, pourquoi le toluène doit-il être ajouté goutte à goutte conformément à la norme ?Quelle est la fonction ?
Notre société a examiné de nombreuses informations, les a résumées et les a partagées avec vous ci-dessous :
Principe : Le nom chinois de l'ONPG est o-nitrobenzène-β-D-galactopyranoside.L'ONPG peut être hydrolysé en galactose et en o-nitrophénol jaune (ONP) par la β-galactosidase, de sorte que l'activité de la β-galactosidase peut être détectée par le changement de couleur du milieu de culture.
Le lactose est un sucre que la plupart des micro-organismes doivent détecter.Son métabolisme nécessite deux enzymes, l'une est la perméase cellulaire, le lactose pénètre dans les cellules sous l'action de la perméase ;l'autre est la β-galactosidase, qui hydrolyse le lactose en galactose.Lactose et glucose.La β-galactosidase peut également agir directement sur l'ONPG pour l'hydrolyser en galactose et en o-nitrophénol jaune (ONP).Cela peut se faire en 24h, même avec des fermenteurs retardés au lactose.Par conséquent, il explique les résultats d'observation de la cueillette de la culture 1 de la pente d'agar et de son inoculation dans un cercle complet à 36°C pendant 1-3h et 24h.Si la β-galactosidase est produite, elle deviendra jaune en 1-3h, s'il n'y a pas une telle enzyme, elle ne changera pas de couleur en 24h.
Selon les deux enzymes ci-dessus, les micro-organismes peuvent être divisés dans les catégories suivantes :
1 bactérie fermentant le lactose (18-24 heures) avec la perméase et la β-galactosidase P+G+ ;
2 Fermenteurs de lactose retardés (plus de 24 heures) dépourvus de perméase mais possédant de la galactosidase : P- G+.
3 Fermenteurs sans lactose dépourvus à la fois de perméase et de galactosidase : P- G-.
Le test ONPG peut être utilisé pour distinguer les bactéries à fermentation tardive du lactose (P-G+) des bactéries à lactose non fermentant (PG-), telles que :
1 Différencier les fermenteurs tardifs du lactose (P- G+) des fermenteurs sans lactose (P- G-).
(a) Citrobacter (+) et Salmonella arizonae (+) de Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) de Shigella sonnei (-).
Pourquoi le test ONPG a-t-il été effectué en utilisant une culture d'une nuit sur du chlorure de sodium à 3 % de trisaccharide ferrique (trisaccharide de fer) ?Notre société a consulté beaucoup d'informations, mais il n'y a pas de déclaration claire.Uniquement sur le site Web de la FDA, il est écrit que "Inoculer les cultures à tester sur des pentes de gélose au fer triple sucre et incuber pendant 18 h à 37 ° C (ou à une autre température appropriée, si nécessaire). Des pentes de gélose nutritive (ou autre) contenant 1,0 % de lactose peut également être utilisé."signifie : les bactéries testées ont été inoculées sur le milieu fer trisaccharidique et cultivées à 37°C pendant 18h.Les milieux inclinés de gélose nutritive (ou autre) contenant 1 % de lactose sont également acceptables.Par conséquent, on en déduit que le milieu de fer trisaccharidique contient du lactose.Après une nuit de croissance, les bactéries ont produit une bonne β-galactosidase active.En utilisant de telles bactéries, l'ONPG peut être décomposé plus rapidement par la β-galactosidase.Le phénomène expérimental est plus rapide et mieux manifesté.De plus, l'ajout goutte à goutte de toluène et un bain d'eau pendant 5 min sont tous dans le but de libérer complètement la β-galactosidase.
